分類: LDT

原始論文：Byron, S. A., Van Keuren-Jensen, K. R., Engelthaler, D. M., Carpten, J. D., & Craig, D. W. (2016). Translating RNA sequencing into clinical diagnostics: opportunities and challenges. Nature Reviews Genetics, 17(5), 257–271. doi:10.1038/nrg.2016.10

 

論文的最後，談到這些新科技如何整合進臨床之中

第一個重點就是“新的檢測（這邊指得當然就是RNAseq）”，要能變成現行臨床工作的一部份，需要符合許多特性，可以由三個層面一步步來看，分別是Analytical validity (檢測本身的效力)、Clinical validity（臨床上的檢測能力）、Clinical utility（對於最終的臨床決策的貢獻度）。

第一步：Analytical validity

相對於實驗室裡的檢測，處理的檢體都是在control condition下，所以要能讓每一次的實驗都能reproducible的技術門檻就比較低，對比於臨床簡體的複雜性，還要能在此狀況下維持檢驗的穩定性、感測極限等等，就是第一關的重要門檻，要能在有良好的檢測標準來提供檢測sensitivity、specificity的驗證，再來是每次重複的結果應該要相似的（reproducibility），不會因為微小的變數造成數值的大波動。（robustness），如前exosome的研究便是因為其容易波動而造成無法定量。

以RNAseq來看，撇開前製定序所花的不算，光後端的分析方式、參數的差異，就會造成結果有所不同，在2013年，Genetic European Variant in Disease consortium為了解決這問題設計了一組實驗來處理這些technical reproducibility和feasible的問題，收集了465個人的lymphoblastoid cell，在七個定序中心分別執行，最後總結了一些在後端上可以用來驗證定序結果的，像是GC content、fragment size、transcript length、percentage of reads mapped to annotated exon (這部分可以參考所謂的annotation QC)。除此之外，由FDA領頭的SEQC study和ABRF study也有大量研究為了解決和提出相關標準。

Su, Z. et al. A comprehensive assessment of RNA-seq accuracy, reproducibility and information content by the Sequencing Quality Control Consortium. Nat. Biotechnol. 32, 903–914 (2014).

Li, S. et al. Multi-platform assessment of transcriptome profiling using RNA-seq in the ABRF next-generation sequencing study. Nat. Biotechnol. 32, 915–925 (2014).

 

第二步: Clinical validity

當檢測技術能在臨床檢體上保持者可重複性時，接下來檢測就要達成可以實際區分biological difference的區別力。

第三步: Clinical utility

當前兩部都達成後，再來要看這個檢驗的結果能如何改變治療，如同companion diagnostic等等，通常此時就需要setup 臨床的試驗，來看實際在臨床場域中的效果！

 

除此之外，FDA也有針對RNAseq為主的檢測項目做出一些法規的架構，可以由此深入看美國FDA對於NGS技術延生的檢測所抱持的想法

US Department of Health & Human Services. Center for Devices and Radiological Health. FDA notification and medical device reporting for laboratory developed tests (LDTs) — draft guidance. [online]  (2014).

US Department of Health & Human Services. Center for Devices and Radiological Health. Framework for regulatory oversight of laboratory developed tests (LDTs) — draft guidance. [online]  (2014)

US Department of Health & Human Services. Optimizing FDA’ s regulatory oversight of next generation sequencing diagnostic tests — preliminary discussion paper. [online]  (2014).

Evans, B. J., Burke, W. & Jarvik, G. P. The FDA and genomic tests—getting regulation right. N. Engl. J. Med. 372, 2258–2264 (2015).